1.7 µm的亚乙基桥杂化颗粒[BEH]是UPLC^®技术得以实现的关键要素之一。该产品目前提供三种不同的粒径[130Å、200Å和300Å]以及几种用于反相色谱和亲水作用色谱的键合相，适用于从小分子分析到大分子生物制药分析的各类应用。杂化颗粒技术因其固有的化学稳定性而能采用更宽的pH范围[pH 1-12]，从而可为方法开发提供一种通用且可靠的分离技术。

XBridge™系列HPLC色谱柱中的BEH颗粒技术色谱柱具有多种HPLC粒径[2.5、3.5、5和10 µm]，从而实现了HPLC和UPLC两种技术平台之间的无缝转换。

1.7 µm的ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈和C₈柱因能提供无以伦比的峰对称性、柱效和化学稳定性而成为适合各种分析物的通用、高效分离色谱柱。因具有在pH1-12范围内进行操作的耐受性，这些三键键合型烷基柱能够利用pH的力量影响可电离化合物的保留、选择性和灵敏度，同时在低pH和高pH条件下均保持异乎寻常的稳定性。

选择性

由于较小的温度变化也可能引起选择性的较大漂移，EPA方法8330进行HPLC分离通常要求将温度偏差控制在±1°C范围内。UPLC技术分离度的提高使方法耐用性更强，对温度的敏感性较低（温差在±5°C范围内）。

由于可能需要无数次地对方法参数进行试验，因此开发一种新的色谱方法是一项既繁重又耗时的工作。对任何方法开发策略而言至关重要的一点都是找到一种既可实现所需分离又能确保分离方法耐用可靠的合适色谱柱。

沃特世的方法开发套装由几种选择性各异的UPLC^®色谱柱组成，可满足您的方法开发需求并使方法开发过程快速、有效。

 反相色谱和HILIC的方法开发策略

A. 得益于选择性多样的各种UPLC色谱柱，通过使用单一流动相条件筛选多种色谱柱可快速得出成功结果。

B. 使用新型反相和HILIC色谱开发适用于吗啡类化合物的方法。

ACQUITY UPLC^® BEH HILIC柱利用一种未键合的BEH颗粒提高强极性物质的保留并为极性和可电离化合物提供一种正交分离模式。

ACQUITY UPLC BEH HILIC柱经过优化和测试，可在UPLC^® HILIC条件下进行高效、可重现的分离，并经专门设计以克服HILIC固定相的一种主要弱点——化学稳定性。结实耐用的BEH颗粒的较宽 pH应用范围克服了这种化学不稳定性问题并延长了色谱柱的使用寿命。

使用ACQUITY UPLC BEH HILIC柱分离强极性碱性物质

吗啡等类鸦片止痛剂用于慢性和急性疼痛的处置。这类药物效力极强，可导致体液内残留低剂量、低浓度的药物。关于吗啡及其代谢物的体内功效和代谢研究需要采用诸如亲水作用色谱（Hydrophilic Interaction Chromatography，HILIC）等选择性好且灵敏的分析方法。在上述HILIC分离中，极性更强的代谢物“吗啡-3-ß-葡萄糖苷酸”在极性较弱的母体化合物“吗啡”之后被洗脱出来。 

一种方法的成功转换需要仔细考虑并了解清楚诸如柱尺寸、系统体积和规格、进样体积和梯度特征等关键参数。除了对所有方法参数进行适当的几何比例计算之外，分析方法的成功转换还需要保持色谱柱的选择性和分离度不受粒径改变的影响。

方法转换套装为某种分离方法在UPLC^®和HPLC平台之间进行转换时保持其完整性而设计。根据保持柱长[L]与粒径[dp]之比[L/dp]的原则，这些产品套装提供一根ACQUITY UPLC^®柱以及一根具有相同选择性和分离度的HPLC柱。通过使用ACQUITY UPLC柱计算器，相关方法可从HPLC完全转换至UPLC，反之亦然。

每种产品套装都包含一根UPLC柱和一根HPLC柱。ACQUITY UPLC柱计算器可从“ACQUITY UPLC在线社区”（www.waters.com/myuplc）下载。

在液相色谱技术平台之间实现轻松转换

对氯氮平及其相关化合物进行的分离示例，用于证明不同粒径色谱颗粒在仪器平台之间的选择一致性确保方法的成功转换。

ACQUITY UPLC^® BEH苯基柱包含三键键合型苯己基配体，从而与其他市场品牌相比可提供行业领先的pH稳定性、批间重现性和异乎寻常的峰形。ACQUITY UPLC BEH苯基柱设计用于提供与直链烷基柱互补的选择性，特别适用于含有芳香环的分析物。

分离紫锥菊中的咖啡酸衍生物

各种紫锥菊制剂中的活性成分可分成三个主要类别：咖啡酸衍生物、多糖、亲脂成分。多项研究表明常见的含紫锥菊产品质量存在差异。因此，需要对紫锥菊活性成分进行科学监测。本文表明用不到4分钟的时间就可将经证实具有抗氧化属性的咖啡酸主要衍生物——多酚化合物——分离开来。

色谱柱的重现性对分析方法的长期可靠性和稳健性有着重要影响，但其重现性却完全不在用户的控制范围内。

凭借异乎寻常的批间和柱间重现性，沃特世享有盛誉的填料颗粒和色谱柱生产工艺控制可确保您的分析方法保持长期可靠。ACQUITY UPLC^®方法验证套装包括三个不同批次的色谱填料（从不同的基质颗粒键合得到），以评估色谱分析方法的质量、可靠性和稳定性。

色谱柱性能可靠，风险最低

源自三种不同基质颗粒的三个不同批次的键合填料显示，ACQUITY UPLC柱能够提供预期的稳定重现性，从而可确保分析方法可长期重现。 

ACQUITY UPLC^® BEH Shield RP18柱在C₁₈碳链内增添了一个亲水性氨基甲酸盐基团，可为碱性化合物提供异乎寻常的对称峰形，并提供与直链烷基柱互补的选择性。

止痛药的快速分离

非处方用止痛药专为缓解疼痛而设计。止痛药因其价格低廉、疗效显著且安全可靠而成为多数医师的首选药品之一。本文表明用不到1.5分钟的时间就可将七种常见止痛药分离开来。请注意BEH Shield RP18键合相中嵌入的极性配体所提供的选择性变化。

*Patent No. 5,374,755

沃特世提供一系列基本配件，完美适用于ACQUITY UPLC^®系统：

过滤膜

我们建议您在开始分析前先用0.2 µm过滤膜对缓冲液和样品进行过滤。过滤可避免色谱柱和仪器部件内积聚颗粒物，从而可延长色谱柱的使用寿命并最大限度缩短系统的停机时间。使用0.2 µm GHP过滤膜过滤水溶液、非极性溶剂和蛋白质。

样品瓶

我们建议在UPLC^®系统中使用预开口式硅胶/PTFE隔垫样品瓶。预开口式隔垫设计用于实现正确通气，以确保样品抽吸体积具有重现性。沃特世提供两个系列的经认证样品瓶产品：经认证的LC样品瓶瓶和经认证的LCMS样品瓶。

Sirocco蛋白质沉淀板

Sirocco™蛋白沉淀板可实现高通量的“孔内”蛋白沉淀。这个独特的过滤系统——带有通气盖垫及专利阀门技术——使您可在“孔内”处理样品并从更小体积的血浆中收集得到纯净的滤液而无需转移步骤。

亲水作用色谱

从2003年起，沃特世已经研制出用于亲水作用色谱（Hydrophilic Interaction Chromatography，HILIC）的创新型固定相，可解决强极性化合物不易保留的难题。ACQUITY UPLC^® BEH酰胺柱以沃特世新颖的亚乙基桥杂化颗粒[BEH]技术为基础并利用一种具有化学稳定性的三官能团键合型酰胺固定相，从而使 HILIC 分离的稳定性和灵活通用性达到了一个新的高度。

ACQUITY UPLC BEH酰胺柱为保留因极性超强而无法使用反相[RP]色谱实现保留的极性分析物和代谢物而设计，适用于较宽的流动相pH值范围[2-11]，从而可促使在极性、结构片段和pKa方面差别范围大的各种极性分析物得到不同寻常的保留与分离。

除了增强对极性化合物的保留，，这些色谱柱还可提供更强的质谱响应，可与样品制备洗脱液[PPT、LLE和SPE]直接兼容，并具有相对于反相分离填料的正交选择性，从而使HILIC成为一种引人注目的备选分离技术。

水溶性维生素的分离

 碳水化合物的分析

最常使用HILIC进行分析的一类丰富且各异的分析物种类就是碳水化合物（如：单糖、二糖、寡糖和多糖）。

ACQUITY UPLC BEH酰胺柱是一种用于碳水化合物分析的出色工具，它具有以下优点：

• 1.7 μm的粒径既能实现高分辨率、快速分析复杂样品基质中的碳水化合物，同时又能保持或提高色谱分辨率；
• 柱填料化学稳定性的增强允许使用高pH和高温的分析条件，从而合并还原糖差向异构体峰，缩短分析时间并提高了质谱检测水平；
• BEH 颗粒技术结合以三键键合型酰胺固定相，提供了异乎寻常的色谱柱使用寿命，从而提高了分析耐用性；
• 不像用于碳水化合物分析的胺基色谱柱，ACQUITY UPLC BEH酰胺柱对希夫式碱的形成不敏感，由此可提高定量分析的准确度；
• 可兼容于高pH条件流动相便于进行质谱检测，而不需进行柱后衍生化处理或，与金属阳离子相络合，从而可大幅度简化LC/MS分析开始前的样品预处理过程并提高分析方法灵敏度。

糖类物质的UPLC/MS分析

VanGuard™预柱是我们历时两年多开发出的产品成果，它们是为在高达15000 psi[1000Bar]的压力下使用 ACQUITY^® 超高效液相色谱系统常规运行应用项目而设计的首款保护柱装置。VanGuard预柱以一种可有效保护UPLC^®柱性能的内径2.1 mm ×长度5 mm的超小体积设计为特色。这种正在申请专利的设计并不会通过折衷UPLC全面设计的途径来提高效率、分辨率和处理量，因为VanGuard预柱也使用相同的ACQUITY UPLC^®柱固定相和柱筛板。由于VanGuard预柱与ACQUITY UPLC柱入口直接相连，因此柱外体积被减至最小，而由于附加连接所引起的流动相泄漏可能性几乎被彻底消除。

VanGuard预柱的关键特性和优势

 VanGuard预柱对色谱分离的影响性能最小

VanGuard预柱的独特设计旨在尽可能不影响色谱分析效果的同时，保护和延长ACQUITY UPLC色谱柱性能。