术语表
术语
HPLC指数 – 如Browne、Bennet和Solomon所述，该指数可在使用TFA:水:乙腈作为缓冲液体系从C18 μBondapak色谱柱上洗脱肽时预测所需的乙腈比例。
被动分流器 – 用于按指定分流比连续对制备级流量进行采样的装置；可控制质谱引导的纯化中的检测器信号。
补偿溶剂 – 在质谱引导的纯化系统中，用于稀释分流自制备级流量的样品并将其输送至检测器的溶剂。
侧链保护基团 – 连接到氨基酸侧链上，用于防止侧链在肽合成过程中与其它分子发生反应的有机分子。
单同位素质量数 – 采用分子中各元素丰度最高的同位素质量数计算得到的质量数。
等度 – 流动相组成在分离过程中保持恒定的色谱分析方法。
电荷态 – 质谱仪基于质荷比(m/z)执行分析，其中z即为电荷态。其计算方法是将同位素间的分子实际质量数差除以1 Da（同位素间的理论质量数差）。
单电荷 m/z = (M+H)/1
双电荷 m/z = (M+2H)/2
n电荷 m/z = (M+nH)/n
多电荷离子的同位素峰之间相差1/n Da（例如双电荷离子的同位素峰间隔为0.5 Da）。多电荷离子扩展了质谱仪的质量数范围。
电离 – 使得分子通过得失电子而带电的过程。
电喷雾电离 – 一种大气压电离技术，该技术几乎不产生碎片离子，非常适用于分析极性化合物和生物分子。
发色团 – 可吸收特定频率的光的分子基团。
反相色谱 – 所用流动相的极性强于色谱柱填料极性的一类分离方法，该方法基于化合物与非极性固定相之间的相互作用分离化合物。
分段梯度 – 保持梯度平缓部分（即梯度聚焦部分）前后的梯度斜率不变，从而使上述分离阶段的色谱图保持不变的分离方法。
分离度 – 两色谱峰的宽度与其之间的距离之比。
分流比 – 在质谱引导的纯化过程中，从样品流中连续“取出”并进行稀释之后送入检测器的样品量。
固相肽合成 – 将C端起始氨基酸连接到固定支撑物上，按照序列添加氨基酸以延长肽链，从而构建目标肽的过程。
硅醇 – 硅胶基质色谱柱填料上的一种化学基团，可与样品发生相互作用。
离子交换色谱 – 利用表面键合带电官能团的色谱柱分离化合物的色谱方法。
连续数据 – 显示质谱图中所有信号的完整分布曲线。
裂解 – 固相肽合成过程中将肽从树脂上去除的操作。
流动相 – 用于从色谱柱上洗脱化合物的溶剂。
流动相改性剂 – 混入色谱流动相中，用于改善分离效果的添加剂。
平缓梯度 – 单位色谱柱体积内有机溶剂比例变化速率较慢的分离方法。
平均质量数 – 根据同位素组成确定的离子或分子质量数。
去保护 – 去除氨基酸侧链保护基团，在固相肽合成过程中也指去除N-端肽保护基团。
去热原 – 色谱柱清洁步骤，使用1 M氢氧化钠去除可能污染终产物和引发过敏样反应的化合物（即多糖）。
色谱柱体积 – 色谱柱柱体内部的体积。
上样量 – 可进样至特定规格色谱柱的化合物量。
疏水 – 不易溶于水、不易与水混溶或不易被水浸润。
死体积 – 即系统体积。
缩放 – 在分离效果保持不变的前提下，将方法在不同规格色谱柱之间进行转换的过程。
梯度聚焦 – 仅针对产物制定的梯度，具体是将上样时的低溶剂强度迅速提高至产物峰预计洗脱浓度以下5%。分离肽时，梯度中平缓区段的最佳斜率约为单位柱体积变化0.25%~0.33%。肽产物洗脱后，用高浓度有机溶剂冲洗色谱柱，然后在初始条件下重新建立平衡。
体积排阻色谱 – 根据化合物在溶液中的大小对其进行分离的色谱技术。
系统体积 – 即死体积或延迟体积。
线性梯度 – 流动相组成在定义的一段时间内会发生变化的色谱分析方法。
斜率 – 梯度分离过程中单位色谱柱体积内有机溶剂组成的变化速率。
延迟体积 – 色谱系统中，从梯度混合处到色谱柱柱头的体积。
液相肽合成 – 在溶液中通过有机合成反应生成肽的过程。短肽段可缩合形成长肽序列。
载量 – 载样量；与色谱柱体积直接成正比。
质心 – 经过处理的连续数据，显示质谱图中每种离子分布的单一中心点，并且在质谱图中以棒状图的形式显示。
主动分流器 – 按照用户设定的分流比对制备级流量进行采样，通过这种方式来控制质谱检测器信号的装置。然后由补偿溶剂对采集的样品进行稀释并输送至检测器。
柱头稀释 – 通过在色谱柱柱头处使用强溶剂稀释样品来提高载量、改善分离度、延长色谱柱寿命和提升LC系统稳定性的专利进样技术。
有用的应用纪要和参考文献
1. Fosgerau K, Hoffmann T. Peptide Therapeutics; Current Status and Future Directions.Drug Discovery Today, Vol. 20, Number 1, January 2015.
2. Uhlig T, Kyprianou T, Martinelli FG, Oppici CA, Heiligers D, Hills D, Calvo XR, Verhaert P.The Emergence of Peptides in the Pharmaceutical Business: From Exploration to Exploitation.EuPA OPEN PROTEOMICS 4 (2014) 58-69.
3. Merrifield RB.Solid Phase Peptide Synthesis.I.The Synthesis of a Tetrapeptide.Journal of the American Chemical Society.1963, 85(14)2149-2154. doi: 10.1021/ja00897a025.
4. Gu F, Chodavarapu K, McCreary D, Plitt TA, Tamoria E, Ni M, Burnham JJ, Peters M, Lenhoff AM.Silica-based strong anion-exchange media for protein purification.Journal of Chromatography A, 1376 (2015) 53-63.
5. Lenhoff AM.Protein adsorption and transport in polymer-functionalized ion-exchangers.Journal of Chromatography A, 1218 (49) (2011) 8748-8759.
6. Garcia MC.The effect of mobile-phase additives on sensitivity in the analysis of peptides and proteins by high-performance liquid chromatography-electrospray mass spectrometry.Journal of Chromatography B, 825 (2005) 111-123.
7. Arsenault JC, McDonald PD.Beginner’s Guide to Liquid Chromatography,Waters Corporation, 715001531, 2007.
8. Link AJ, Trends Biotechnol.20 (2002) 8.
9. Shi G, Wu J, Li Y, Geleziunas R, Gallagher K, Emm T, Olah T, Unger S. Rapid Commun.Mass Spectrom.16 (2002) 1092.
10. Paula Hong, Stephan Koza, and Edouard S. P. Bouvier.Size-Exclusion Chromatography for the Analysis of Protein Biotherapeutics and their Aggregates.J. Liq Chromatogr Relat Technol.2012 Nov; 35(20): 2923–2950.
11. Irvine GB.Size-Exclusion High-Performance Liquid Chromatography of Peptides:A Review.Analytica Chimica Acta 352 (1997) 387-397.
12. Porath J., Flodin P. Nature 183 (1959) 1657.
13. Koza S., Successfully Developing and Using Size-Exclusion Chromatography Methods for the Analysis of Biotherapeutic Proteins.Waters Seminar, 2016.
14. Skoog D.A., West D.M.Fundamentals of Analytical Chemistry, Third Edition, Holt, Rinehart and Winston [1976], p. 232.
15. Morrison R.T., Boyd R.N.Organic Chemistry, Third Edition, Allyn and Bacon, Inc. [1973]p. 1137.
16. Browne C.A., Bennett H.P.J., Solomon S. The Isolation of Peptides by High-Performance Liquid Chromatography Using Predicted Elution Positions.Analytical Biochemistry.Vol. 124, Issue 1, 15 July 1982, 201-208.
17. Aubin A., Jablonski J.Prep 150 LC System: Considerations for Analytical to Preparative Scaling.Waters Application Note 720005458EN.July 2015.
18. Preparative OBD Columns Wall Chart.Waters 720002117EN, October 2012.
19. Snyder L.R., Glajch J.L., Kirkland J.J.Practical HPLC Method Development,John Wiley and Sons, Inc., [1988], p. 93.
20. Jablonski J., Wheat T., Diehl D. Effective Use of Temperature Control in Compound Isolation.Waters Technical Note 720002954EN.February 2009.
21. Jablonski J., Wheat T., Diehl D. Developing Focused Gradients for Isolation and Purification.Waters Technical Note 720002955EN.February 2009.
22. Neue U. HPLC Columns Theory, Technology, and Practice, Wiley-VCH, Inc.,[1997], p. 318.
23. Jablonski J., Aubin A. Peptide Isolation Using the Prep 150 LC System. Waters Application Note 720005455EN.July 2015.
24. Think Peptides®.ST55V1.0, ©2012, ProImmune Limited, p. 10-11.
25. At-Column Dilution, U.S. Patent No. 6,790,361 B2
26. At-Column Dilution Application Notes, Waters Application Note, 71500078010.2003.
27. Neue U. HPLC Columns Theory, Technology, and Practice, Wiley-VCH, Inc.,[1997], p. 376.
28. Unique New Columns for Peptide Separations, Waters Wall Chart 720001821EN.August 2006.
29. Uhlig S., Negard M., Heldal K., Straumfors A., Madso L., Bakke B., Eduard W. Profiling of 3-hydroxy Fatty Acids as Environmental Markers of Endotoxin Using Liquid Chromatography Coupled to Tandem Mass Spectrometry.Journal of Chromatography A, 1434 (2016) 119-126.
30. Balogh M.P. The Mass Spectrometry Primer.Waters Corporation, 715001940, 2009.
31. Apffel A., Fischer S., Goldberg G., Goodley P.C., Kuhlmann F.E.Journal of Chromatography.A 712 (1995) 177.
32. Jablonski J., Wheat, T., Optimized Chromatography for Mass-Directed Purification of Peptides.Waters Application Note, 720000920EN.June 2009
33. Volmer D.A., Leslie A.D.Dealing With the Masses: A Tutorial on Accurate Masses,Mass 32 Uncertainties, and Mass Defects, Spectroscopy.Vol. 22, Issue 6,June 1, 2007.
34. Murray K.K., Boyd R.K., Eberlin M.N., Langley G.J., Li L., Naito Y. Definition of Terms Relating to Mass Spectrometry (IUPAC Recommendations 2013).Pure Appl.Chem., Vol.85, No.7, pp. 1515-1609, 2013.
35. Yergey J., Heller D., Hansen G., Cotter R.J., Fenselau C. Anal.Chem.55, 353 (1983).
36. Banerjee S., Mazumdar S.Electrospray Ionization Mass Spectrometry: A Technique to Access the Information Beyond the Molecular Weight of the Analyte.Hindawi Publishing Corporation, International Journal of Analytical Chemistry, Vol. 2012,Article ID 282574, 40 pages.Doi:10.1155/2012/282574
37. Mass Data Terminology, Considerations, and Interpretation.Waters Corporation,715004945, August 2015.
38. Morimoto B. Special Issue on Oligos and Peptides.Chemistry Today, April 2016.
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